紫外分光光度计是实验室用于物质定性、定量分析的精密光学仪器，其核心是通过测量物质对紫外-可见区域（通常200-800nm）光的吸收程度来分析样品。由于涉及光学系统、电子元件和化学样品，操作时需严格遵循规范，以确保测量精度、设备寿命和人员安全。以下按“操作前-操作中-操作后”流程梳理核心注意事项：

 

操作前：准备与检查——奠定测量准确性基础

 

操作前的准备工作直接影响分析结果的可靠性，需重点关注设备状态、样品处理、环境条件三个维度。

 

1.设备状态检查

 

外观与连接确认：

 

检查仪器外壳、比色皿槽、操作面板是否完好，无破损、污渍；电源线、数据线连接是否牢固，接地是否可靠（避免电磁干扰导致数据波动）。

 

打开仪器电源前，确认波长调节旋钮、透射比/吸光度切换键等功能键处于“初始状态”（如波长调至常用范围，模式设为“吸光度”）。

 

预热与自检：

 

仪器开机后需预热20-30分钟（不同型号略有差异），待光源（氘灯用于紫外区200-400nm，钨灯用于可见区400-800nm）稳定、显示屏无报错后再使用。

 

部分的仪器具有“自检功能”（如波长精度、基线平直度校验），需确认自检通过（若自检失败，需联系维修人员，不可强行使用）。

 

比色皿适配性检查：

 

确认比色皿材质与测量波长匹配：石英比色皿适用于200-800nm全波段（紫外+可见），玻璃比色皿仅适用于400-800nm可见区（玻璃会吸收紫外光，导致数据失真）。

 

检查比色皿是否完好：无裂纹、划痕，透光面（两侧光滑面）无污渍、指纹；比色皿配对性（同一批次、同一规格）需一致，避免因壁厚差异导致误差。

 

2.样品与试剂准备

 

样品处理规范：

 

样品需澄清透明，无悬浮颗粒、沉淀（若有浑浊，需先过滤或离心处理），否则会因光散射导致吸光度偏高。

 

样品浓度需适配仪器量程：通常吸光度应控制在0.2-0.8之间（此范围线性关系最佳，误差最小）；浓度过高需稀释（用与空白一致的溶剂稀释，记录稀释倍数），浓度过低可浓缩或选择长光程比色皿（如10mm→50mm）。

 

溶剂与空白选择：

 

溶剂需在测量波长范围内“无吸收”（如甲醇、乙醇适用于紫外区，水适用于大部分可见区），避免溶剂干扰。

 

空白溶液需与样品“基体一致”（如样品用甲醇稀释，则空白为纯甲醇；若为显色反应样品，空白为“试剂+溶剂，不加待测组分”），用于扣除背景吸收。

 

容器清洁要求：

 

比色皿、移液管、容量瓶等需用蒸馏水或溶剂润洗3次（避免残留污染），洗净后倒置晾干（透光面朝下，避免划伤）；严禁用硬纸、纱布擦拭透光面（需用镜头纸轻轻吸干水分）。

 

3.环境条件控制

 

避免光学干扰：仪器需放置在无直射阳光、无强光照射的位置（阳光会干扰紫外光源，导致读数不稳定），必要时关闭实验室灯光或使用遮光罩。

 

控制温湿度：理想环境温度为15-30℃，相对湿度≤75%；湿度过高易导致光学元件发霉、电子元件短路，湿度过低易产生静电干扰。

 

远离振动与腐蚀：避免将仪器置于离心机、震荡器等振动设备旁（光学系统移位会影响精度）；远离强酸、强碱等腐蚀性气体（损坏镜面膜层）。